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　　羅河豚毒实验法袁1。白鼠螁○使用19~21g的出生4周的ddy系或者ICR系的健康的公鼠。蚆2。检验体的提取蚅○河豚的毒性有很大的个体差异,所以需要多条试验体。如果提取的是全鱼体,试料需要用冰或者dryice来冷却搬运,袂长距离运输时需要用dryice来冻结搬运。检查河豚毒时(鱼种名)是很重要的,所以必要时需要专家的协助。袀3。试料的制作及萃取膅(1)醋酸萃取法(高毒性试料的萃取)蒅○将皮和肌肉用剪刀剪细一些,然后用Mixer磨细后,取10g到(烧杯),%,羄然后冷却过滤,%浓度醋酸反复清洗,。衿(2)酸性(甲醇)萃取(低毒性试料的萃取)膆○将皮和肌肉用剪刀剪细一些,然后用搅拌器磨细后,取10g到装有环流冷却管的200ml容积的(长颈瓶)中。加入PH值为3~4的酸性(甲醇)螁,然后连接到环流冷却管,在70~75度温度下加温10分钟。此操作反复进行3次,最后清洗残留物,将滤液合在一起过滤后,减压浓缩。莀加入蒸馏水用分液漏斗移动后用()()2遍,在水槽中减压除去(天空醚),○酸性(甲醇):在1L(甲醇)中加入20ml的冰醋酸(glacialaceticacid)来制造。羆4。白鼠试验螂(1)预备试验葿○将制毒原液用蒸馏水稀释成10,100,1000,10000倍。将1ml的稀释液注射到2只白鼠腹腔内,观察发现的症状及死亡。症状表现为毒量大时做1~5分钟向上蹦的动作后死亡。注射最少注射量(1只)时,最初10~15分钟内没有异常,但出现环眼(眼圈出现白带),四肢麻痹,肚子贴地爬行状态,到25分左右时死亡。死亡的判定是通过呼吸及运动的停止来决定,注射到死亡时间准确记录到秒。蚇(2)真实试验莂○将预备试验中使用的毒液(5~10分钟内死亡时使用的毒液)重新稀释(2倍,4倍,8倍)后,在每个稀释阶段提取1ml毒液,注射到2只小白鼠的腹腔内,如果出现10分钟左右死亡的现象,将此被检毒液1ml再注射到3~5只的小白鼠体内。○将包括活着的小白鼠在内,由中间死亡时间求表-,则由表-2保证各个小白鼠体重的MU后,去中间值。再由得到的MU乘与稀释倍数和提取比,(MU/g)=由致死时间及体重保证得到的MU稀释倍数提取比。膃蚁表-1致死时间-小白鼠单位换算表罿表-2小白鼠体重-小白鼠单位保证表薆袃螂肈羆蚄螄蒀莅莄薁蕿肈膄蚃葡萄状球菌试验法羁1.()菌培养蒈取被检体25g或者25ml加入到加有225ml10%浓度Nacl的TSB培纸(培纸23)后,在35~37度环境中进行16小时()菌培养。○将()菌培养液(接种)(一种植物胶,用海产石花菜类制成,可作冷食或微生物的培养基等)(培纸14)中,在37度环境下培养16~24小时。培养结果为,(甘露醇分解),周边有白色环(蛋黄反映养成)的串状物实施确认试验。○将分离培养的平板培纸上的串状物移动到普通琼脂培纸(培纸8)上,在37度环